[摘要] 目的：构建人NLRP3真核表达载体并证实融合蛋白在人心肌细胞中定位。方法：以人胎脑cDNA文库为模版，PCR扩增NLRP3全长编码基因，亚克隆至p3×FLAG-cmvTM-10表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人心肌细胞中(Human Cardiac Myocytes，HCM)，提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用激光共聚焦扫描显微镜观察FLAG-NLRP3在HCM细胞内定位。结果：NLRP3全长基因序列克隆到了真核表达载体p3×FLAG-cmvTM-10中，酶切鉴定片段大小3111bp。Western blot检测到了融合蛋白FLAG-NLRP3表达,分子量约为114KD。FLAG-NLRP3在人心肌细胞中表达，定位于细胞浆内。结论：成功构建了FLAG-NLRP3全长基因真核表达载体, FLAG-NLRP3蛋白主要定位于心肌细胞浆内。